Skip to content

Analiza genetyczna mięsaka, przypadkowo przeszczepionego od pacjenta do chirurga

2 miesiące ago

441 words

Współczesne koncepcje immunologii nowotworów wywodzą się z klasycznych obserwacji Jensen, Loeb, Tyzzer i Little we wczesnych latach XX wieku odrzucenia przeszczepionych allogenicznych guzów i akceptacji syngenicznych guzów.1 Pomimo tego prawa transplantacji istnieją kilka klinicznych przykładów przypadkowego przeszczepienia złośliwego guza lub komórek nowotworowych do zdrowego biorcy.2-5 Opisujemy przypadkową transplantację złośliwego mięsaka od pacjenta do chirurga. Stosując metody molekularne, wykazaliśmy, że mięsaki u niespokrewnionego pacjenta i chirurga są genetycznie identyczne.
Opis przypadku
32-letni mężczyzna przeszedł operację nagłą w celu usunięcia złośliwego włóknistego histiocytoma z jego brzucha i zmarł wkrótce po powikłaniach pooperacyjnych. Podczas operacji 53-letni chirurg ranił lewą dłoń podczas wkładania odpływu. Zmiana została natychmiast zdezynfekowana i ubrana. Pięć miesięcy później chirurg skonsultował się ze specjalistą od ręki z powodu ciężkiego, opisanego, przypominającego guza, obrzęku, o średnicy 3,0 cm (1,2 cala), w lewej dłoni u podstawy środkowego palca, gdzie został ranny podczas operacja. Obszerne badania, w tym testy laboratoryjne, nie wykazały żadnych oznak niedoboru odporności. Guz został całkowicie wycięty. Badanie histologiczne ujawniło, że był to złośliwy włóknisty histiakoma. Dwa lata później stan chirurga był dobry i nie było dowodów na nawrót lub przerzuty guza.
Patolog, który badał zarówno guz pacjenta, jak i nowotwór chirurga, postawił pytanie, czy nowotwory były identyczne.
Metody
Analiza histologiczna i immunohistologiczna
Próbki tkanki guza od pacjenta i chirurga zatopiono w parafinie i wybarwiono hematoksyliną i eozyną, kwasem nadjodowym Schiffem i plamką van Giesona. Immunobarwienie przeprowadzono metodą avidin-biotyna-peroksydaza, z przeciwciałami przeciw wimentynie, lizozymem, alfa1-antytrypsyną, alfa1-antychymotrypsyną, keratyną, antygenami endomysowymi, S100, aktyną i desminą (wszystkie przeciwciała uzyskano z Dako, Glestrup, Dania). .
Izolacja DNA
Genomowy DNA z próbek krwi obwodowej wyizolowano metodą wysalania . DNA z guza i próbek tkanek zatopionych w parafinie ekstrahowano zgodnie z modyfikacją7 metody Goelza i wsp.8
Analiza krótkich polimorfizmów powtarzających się w tandemie
Krótkie powtórzenia tandemowe polimorfizmów loci HUMTH01, HUMCYAR04 i HUMACTBP2 zostały zamplifikowane przez reakcję łańcuchową polimerazy (PCR) ze znakowanymi fluorescencyjnie starterami. Sekwencje starterów zostały wybrane z opublikowanych sekwencji.9-11 Starter 5 dla HUMCYAR04 był znakowany 5-karboksylofluoresceiną, podczas gdy primery 5 dla HUMTH01 i HUMACTBP2 były znakowane 6-karboksy-2 , 4 , 7 , 4 , 7-heksachlorofluoresceina. Produkty PCR analizowano za pomocą zautomatyzowanego sekwenatora DNA (model 373A, Applied Biosystem Division, Perkin-Elmer, Foster City, CA).
Oparte na sekwencjach typowanie genów HLA
Wpisywanie alleli HLA-DRB1 i DQB1 przeprowadzono przez amplifikację PCR specyficzną dla allelu w połączeniu z sekwencjonowaniem DNA w fazie stałej
[hasła pokrewne: Enteroldronedaron, anakinra, diltiazem ]
[więcej w: kuzynka brzozy, telico żywiec, ciesielczyk suchy las ]

0 thoughts on “Analiza genetyczna mięsaka, przypadkowo przeszczepionego od pacjenta do chirurga”