Skip to content

Klonowanie molekularne i sekwencja nukleotydowa komplementarnych DNA kodujących dehydrogenazę A-koenzym A ludzkiej krótkołańcuchowego łańcucha i badanie podstawy molekularnej niedoboru dehydrogenazy ludzkiego krótkołańcuchowego acylo-koenzymu A.

1 miesiąc ago

226 words

Komplementarne DNA kodujące prekursor dehydrogenazy ludzkiego łożyska krótkołańcuchowych acylo-koenzymu A (CoA) (SCAD) (EC 1.3.99.2) sklonowano i zsekwencjonowano. Wkładki cDNA w tych klonach miały łączną długość 852 zasad i zakodowały cały SCL 412-aminokwasowy prekursor (ciężar molowy 44303). Ta sekwencja zawierała 24-aminokwasowy peptyd liderowy (ciężar cząsteczkowy 2 576) i 388 aminokwasów odpowiadające dojrzałemu białku (ciężar cząsteczkowy 41 727). Porównanie SCAD z sekwencjami dehydrogenazy acylo-CoA o średnim łańcuchu ujawniło wysoki stopień homologii, co sugeruje, że enzymy te wyewoluowały ze wspólnego rodowego genu i należą do rodziny genów. Zbadaliśmy również zmutowany ludzki SCAD w hodowanych fibroblastach skóry od trzech pacjentów z dziedzicznym niedoborem SCAD. Etykietowanie hodowli fibroblastów za pomocą [35S] -metioniny, a następnie immunoprecypitację z przeciwciałem anty-SCAD ujawniło, że syntetyzowano wariant białka SCAD o normalnej wielkości. We wszystkich trzech liniach komórkowych z niedoborem SCAD, rozmiar wariantu mRNA SCAD określony przez Northern blotting przy użyciu jednego z normalnych cDNA SCAD jako sondy był również prawidłowy i nie zaobserwowano żadnej różnicy w przypadku Southern blot w wzorcach restrykcyjnych mutanta. genomowe DNA przy użyciu EcoRI, TaqI, HincII i BamHI. Wyniki te sugerują, że defekty SCAD w tych liniach komórkowych są spowodowane mutacją punktową. Zdjęcia
[hasła pokrewne: kardiomiopatia rozstrzeniowa rokowania, kuzynka brzozy, lordoza lędźwiowa zniesiona ]

0 thoughts on “Klonowanie molekularne i sekwencja nukleotydowa komplementarnych DNA kodujących dehydrogenazę A-koenzym A ludzkiej krótkołańcuchowego łańcucha i badanie podstawy molekularnej niedoboru dehydrogenazy ludzkiego krótkołańcuchowego acylo-koenzymu A.”